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教您如何正确使用大鼠ELISA试剂盒进行标本保存!

发布时间: 2021-12-27  点击次数: 101次
  大鼠ELISA试剂盒实验中标本是非常重要的,经常会出现ELISA操作员反映在标本保存时出现溶血、凝集不全、受细菌污染等现象发生,我们特针对如何正确的保存标本问题做出总结。
  
  1、标本保存不当:
  在冰箱中保存过久的标本,血清中IgG可聚合成多聚体、AFP可形成二聚体,在间接法ELISA测定中会导致本底过深、甚至造成假阳性;标本放置时间过长,有时抗原或抗体免疫活性减弱,亦可出现假阴性。为克服上述干扰,ELISA测定的血清标本宜为新鲜采集;如不能立即测定,5天内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混合后再测定,但混匀时应轻柔,不可强烈振荡。
  
  2、标本溶血:
  由于各种人为原因引起的标本溶血,均可因红细胞破坏溶解时释放出大量具有Peroxidase活性的血红蛋白,在以Horseradish Peroxidase为标记的ELISA测定中,会导致非特异性显色,大鼠ELISA试剂盒干扰测定结果。为克服上述干扰作用,标本采集时必须注意避免溶血。
  
  3、标本凝集不全:
  在没有促凝剂和抗凝剂存在的情况下,正常blood采集后1/2~2h开始凝固,18~24h完全凝固。L床检验工作中,有时为了争取时间快速检测,常在blood还未开始凝固时即Q行离心分离血清,此时的血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果;这类情况于次日复查时因血凝已完全,血清中不再有纤维蛋白原存在,故复查结果变为阴性。为避免上述干扰作用,解决的办法较好是blood标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清,或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
  
  4、标本管中添加物质的影响:
  抗凝剂、enzyme inhibitor及快速分离血清的分离胶等均对ELISA测定有一定干扰作用。
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